PEVIVA常见问题

试剂盒使用问题

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 在手册中,取血清样本时,需要使用无抗凝血剂的试管。如果用抗凝血剂或分离凝胶的试管快速获得血清,会影响测试结果吗?

  试管应不含抗凝血剂的理由是因为,这是获得血清的标准方法。如果使用抗凝血剂,能得到血浆。

  此问题的讨论研究请点击

  https://www.researchgate.net/post/Separating_serum_from_plasma

 

2、是否有关于使用空白管的温度和血清的制备时间的建议?

  当涉及到温度、准备时间和其他有关制备血清的外部因素时,建议按照标准方法做。

  操作指示是只涉及我们的试剂盒和产品,制备血清样品最好取决于所使用的产品。

  

3、封板膜数量

  包装内有2张封板膜。

4、M30M65的标准液A、冲洗液(wash tablet)和终止液是否通用?

  一般来说ELISA的反应终止液是让酶失活,原理上来说,应该是可以通用的,但是我们不能提供终止液的具体配方,无法确定加入后是否对pH有影响,所以还是建议不要混用。
  另外就是标准液A,虽然都是浓度,但是两个标准液PBS和胎牛血清的比例是不同的,为了保证标曲的准确性,也是分开使用的好。

5、如果没有微量震荡器(microplate shaker),有其他解决方法吗?

  震荡是为了让抗体更好的结合,请参照说明书给出的参数震荡孵育。

6、孵育4h 要不要避光

  一般试验孵育放在袋子里面,说明书中抗体需避光保存,孵育时请也尽量避光。

7、结果计算方法

  说明书要三次样条插值(cubic spline)。

8、样品浓度较高需要稀释至“标准A”的4-8倍,但试剂盒中标准A只有2mL,不足以稀释,是否能单卖标准A
  不能单人单卖标准A。建议稀释至1:5甚至1:10实验。


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手册中提及可通过使用人血清(不使用标准A)准备稀释液。能否提供此稀释溶液准备的操作步骤?

  请参阅市售的人血清或血浆样品。

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、手册提及“避光保护”,准备抗体孵化时是否需要避光保护?
  不建议把板置于阳光直射之下,这就是为什么液体为蓝色。建议用铝箔覆盖板和液体。

注意事项

1、M65两款试剂盒的区别

  M65 Epideath® ELISA M65® ELISA 检测含有循环角蛋白K18的病人样品时,能产生相似的信号。两种检测的主要区别在于大部分样品M65® ELISA200-300U/L显示值而M65 EpiDeath ® ELISA在<100 U/L中显示值。

2、检测M30M65比例的注意事项

  需要注意“M30M65的比率”只有在样品中K18水平升高才具有意义。(即M65 EpiDeath® ELISA中>300 U/L
  ( Linder et al., Expert Reviews in Molecular Diagnostics 10, 353, 2010)


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